7R-1. 실제 PCR효율은 이론적인 것 보다 휠씬 떨어진다. 왜 PCR효율이 예상
되는 것 보다 낮아지는 지 그 이유를 설명하라.
: 이상적인 PCR반응의 효율은 100%가 되어야 하는데, 실제 PCR효율은 그것보다 떨어진다. 실제 실험의 효율은 증폭된 사이즈, 이차구조, GC의 양등이 PCR 효율에 영향을 줄 수 있다. 다
1. 정확한 위치에서의 DNA 절단: 염기서열에 특이적인 restriction endonucleases는 클로닝에 필수적인 분자 가위 역할을 한다
2. 자기 자신을 복제할 수 있는 작은 DNA 분자를 선택: 이러한 DNA를 cloning vector라고 한다. Vector는 운반체이며 전형적으로 플라스미드 또는 바이러스의 DNA가 있다.
3. 두 DNA 조각을 공유
Ⅰ. 유전자의 복제, 전사, 번역
1. 개념
1) 중심설(central dogma)
생명체의 유전정보는 DNA에서 중간단계인 RNA를 거쳐 단백질로 전달되며 단백질에 저장된 유전정보는 다시 DNA로 변환되지 않는다는 생물학의 원칙을 말한다. 유전정보를 갖고 있는 DNA는 복제(Duplication)를 통해 자기 자신과 똑같은 DNA를 만들
Ⅰ. 중심설(central dogma)
1. 개념
1) 정의
생명체의 유전정보는 DNA에서 중간단계인 RNA를 거쳐 단백질로 전달되며 단백질에 저장된 유전정보는 다시 DNA로 변환되지 않는다는 생물학의 원칙을 말한다. 유전정보를 갖고 있는 DNA는 복제(Duplication)를 통해 자기 자신과 똑같은 DNA를 만들고 전사(Transcription)를
Transcriptase-Polymerase Chain Reaction)이라고 합니다. 이 경우는 앞에서 설명한 PCR을 시행하기 이전에 RNA로부터 DNA를 합성해 주는 효소(RNA-dependent DNA polymerase)인 reverse transcriptase를 처리한다.
맨 먼저 reverse transcriptase로 RNA를 complementary DNA(cDNA)로 역한다. 이때는 downstream primer만 사용하게 되는데 왜냐하면 RNA
reverse transcriptase.
Functions of Telomere
1. To protect chromosome ends from recombination,
fusion, and from being recognized as damaged
DNA
2. Allowing access to the telomerase enzyme to add
telomere repeats
3. Maintaining Telomeres :
a free DNA end
: unstable, subject to cellular DNA repairing processes degraded by nucleases and participate in end-joining rea
hypersensitivity. Limited research has been conducted in this area, though some potential exists for a variant in the gene HSP70-HOM , whose protein is hypothesized to have direct involvement in the stimulation of an immune reaction to abacavir.
HIV VIRUS
Human Immunodeficiency Virus
RNA genome
Reverse Transcriptase
Glycoprotein gp120, gp41
CD4, chemokine receptor(CXCR4) binding
because of transcription occurring twice
for some parts of the DNA
3. Newly transcribed RNA enters the cytoplasm once more
& It has two roles.
: Can be used as a template for viral protein synthesis
: Can undergo reverse transcription by viral encoded reverse transcriptase
to make dsDNA. This DNA can then reenter the nucleus for amplification.
Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction)
RNA를 double strand로 만들어 주는 효소인 Reverse Transcriptase 처리를 한 후에 PCR을 수행하는 방법이다. 바이러스 RNA가 있는지 없는지 알아보는 정성적인 측정에 사용된다.
2) Real Time PCR
DNA 또는 RNA의 양을 시간에 따라 모니터링 하는 방법. 특별한 PCR기계가 필요하고 프